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高中生詢問如何測定植物過氧化氫酶活性

大家好,我是一名高中生,在電視機上經(jīng)??吹竭^氧化氫酶。據(jù)說過氧化氫酶普遍存在于植物的所有組織中,其活性與植物的代謝強度及抗寒、抗病能力有一定關(guān)系,故常加以測定。我想問問如何測定過氧化氫酶的活性?

  • 回答5

    我們邀請臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師解答上述提問,您可以進行追問或是評價

    林碩 副主任醫(yī)師

    中山大學附屬第三醫(yī)院

    三級甲等

    內(nèi)分泌科

    測定植物過氧化氫酶活性的方法較多,包括紫外吸收法、化學滴定法、分光光度法、氧電極法、極譜法等。 1.紫外吸收法:利用過氧化氫在 240nm 波長下有強烈吸收,而酶促反應(yīng)后過氧化氫減少,吸光度下降,通過吸光度變化計算酶活性。 2.化學滴定法:以高錳酸鉀溶液滴定反應(yīng)后的剩余過氧化氫,根據(jù)高錳酸鉀用量計算酶活性。 3.分光光度法:在特定波長下,通過檢測反應(yīng)體系吸光度的變化來反映酶活性。 4.氧電極法:使用氧電極直接測定反應(yīng)中氧氣的生成量,從而確定酶活性。 5.極譜法:基于過氧化氫在電極上的氧化還原反應(yīng),測定電流變化以計算酶活性。 不同的測定方法各有優(yōu)缺點,在實際應(yīng)用中,應(yīng)根據(jù)實驗條件和需求選擇合適的方法,以準確測定植物過氧化氫酶的活性。

    2025-03-27 22:04
  • 回答4

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    郭立軍 醫(yī)師

    家庭醫(yī)生在線合作醫(yī)院

    其他

    內(nèi)科

    目前沒有一個固定的標準,要根據(jù)過氧化氫酶應(yīng)用來確定它的用量。

    2016-01-25 15:34
  • 回答3

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    趙蕾 醫(yī)師

    家庭醫(yī)生在線合作醫(yī)院

    其他

    內(nèi)科

    過氧化氫酶活性測定你老師應(yīng)該在課堂教過你的只要寫一點就可以了

    2016-01-25 08:43
  • 回答2

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    邢學法 主治醫(yī)師

    冠縣辛集中心衛(wèi)生院

    一級

    外科

    過氧化氫酶的活性測定——紫外吸收法H2O2在240nm波長下有強烈吸收,過氧化氫酶能分解過氧化氫,使反應(yīng)溶液吸光度(A240)隨反應(yīng)時間而降低。根據(jù)測量吸光率的變化速度即可測出過氧化氫酶的活性。紫外分光光度計;離心機;研缽;250ml容量瓶1個;0.5ml刻度吸管2支,2ml刻度吸管1支;10ml試管3支;恒溫水??;0.2mol/LpH7.8磷酸緩沖液(內(nèi)含1%聚乙烯吡咯烷酮);0.1mol/LH2O2(用0.1mol/L高錳酸鉀標定)。1.酶液提?。悍Q取新鮮小麥葉片或其它植物組織0.5g置研缽中,加入2~3ml4℃下預(yù)冷的pH7.0磷酸緩沖液和少量石英砂研磨成勻漿后,轉(zhuǎn)入25ml容量瓶中,并用緩沖液沖洗研缽數(shù)次,合并沖洗液,并定容到刻度。混合均勻?qū)⒘科恐?℃冰箱中靜置10min,取上部澄清液在4000rpm下離心15min,上清液即為過氧化氫酶粗提液。5℃下保存?zhèn)溆谩?.測定:取10ml試管3支,其中2支為樣品測定管,1支為空白管,按表40-2順序加入試劑。表40-2紫外吸收法測定H2O2樣品液配置表管號S1S2S3粗酶液(ml)0.20.20.2pH7.8磷酸(ml)1.51.51.5蒸餾水(ml)1.01.01.025℃預(yù)熱后,逐管加入0.3ml0.1mol/L的H2O2,每加完一管立即記時,并迅速倒入石英比色杯中,240nm下測定吸光度,每隔1min讀數(shù)1次,共測4min,待3支管全部測定完后,按下式計算酶活性。3.結(jié)果計算:以1min內(nèi)A240減少0.1的酶量為1個酶活單位(u)。過氧化氫酶活性(u/gFW/min)=式中A240=AS0-AS0—加入煮死酶液的對照管吸光值;AS1,AS2—樣品管吸光值;Vt—粗酶提取液總體積(ml);V1—測定用粗酶液體積(ml);FW—樣品鮮重(g);0.1—A240每下降0.1為1個酶活單位(u);t—加過氧化氫到最后一次讀數(shù)時間(min)。

    2016-01-25 06:56
  • 回答1

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    王慶松 醫(yī)師

    家庭醫(yī)生在線合作醫(yī)院

    其他

    全科

    雙氧水漂白時間的確定與溫度有關(guān)如果用冷漂法,從測定雙氧水消耗率看,溶液中含有氫離子,而過氧根在氫離子的作用下會生成氫氧根離子,其中氫離子濃度大于氫氧根離子濃度。.

    2016-01-25 06:12
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